Manual de laboratorio para el análisis y la certificación de semillas
Maritza Márquez
Unidad de Tecnología de Semillas
CENIAP-INIA
El Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias (CENIAP), como ente certificador de semillas, tiene la responsabilidad de garantizar a los usuarios del servicio, una óptima calidad de los materiales objeto de certificación (semilla Básica y Certificada). Este es un proceso muy amplio y abarca las etapas de investigación básica y desarrollo del cultivar hasta las actividades subsiguientes de producción, acondicionamiento, análisis de laboratorio, etiquetado, almacenamiento y comercialización. Por consiguiente la unidad de Tecnología de Semillas del CENIAP como órgano regional del Servicio Nacional de Semillas (SENASEM), lleva a cabo todo lo concerniente al proceso de certificación, rigiéndose según las normas establecidas en la Resolución del MAC-DGSDA N° 159 de abril de 1986.
En lo que respecta a la etapa de laboratorio, el analista de semillas evalúa por medio de pruebas físicas, fisiológicas y fitosanitarias la calidad de una muestra de semillas representativa de un lote en particular. Una vez cumplidos los requisitos de calidad exigidos para su comercialización, se le otorga la etiqueta según la categoría de semilla a la cual corresponda: fundación, registrada, certificada o fiscalizada; siendo ésta garantía de una óptima calidad. Igualmente se realizan los análisis a semilla muestreada por particulares o empresas importadoras de semillas.
El manual expuesto a continuación recoge el procedimiento a seguir desde que la muestra es entregada al laboratorio hasta la entrega de las etiquetas a las empresas productoras, de los lotes objeto de certificación. Se espera que todos aquellos usuarios (técnicos, pasantes, empresas productoras, estudiantes) hagan uso de estos procedimientos, garantizando de esta manera la estandarización del mismo.
Objetivos
· Facilitar a los usuarios de los laboratorios del INIA (técnicos, pasantes, estudiantes y personal de empresas productoras e importadoras de semillas) el uso correcto del procedimiento que se realiza en el laboratorio para la certificación y/o análisis de semillas.
· Estandarizar el procedimiento de laboratorio para la certificación y/o análisis de semillas en los laboratorios del INIA.
Capítulo 1
Flujograma de procedimientos de laboratorio para la certificación y/o análisis de semillas
En el Laboratorio se realizan los análisis de semilla con la finalidad de garantizar el valor de éstas para su utilización por el agricultor. Para ello, el analista de semilla evalúa, por medio de análisis de humedad, pureza, mezcla de tipo (maíz), vigor, viabilidad y germinación, la calidad de la muestra de semilla representativa de un lote en particular y determina si cumple con los requisitos mínimos exigidos.
Es de gran importancia que todos los laboratorios del INIA utilicen procedimientos y documentaciones estandarizados, con el fin de que sean lo más similares posibles.
A continuación se describe detalladamente mediante un flujograma (Figura 1) los pasos a seguir de todo el proceso que se ejecuta dentro del laboratorio desde el momento de recibir una muestra de semilla hasta la entrega de las etiquetas de certificación impresas (cuando se trata de semilla certificada) e informe de resultados (cuando se trata de semilla muestreada por particulares).
Capítulo 2
Etapas del proceso
1. Antes de los análisis
a) Toma de muestra
La primera etapa se cumple en los almacenes de depósito de semilla de las empresas productoras, donde los técnicos autorizados realizan el "muestreo oficial" y las muestras son entregadas al laboratorio; en otros casos son los particulares e interesados quienes toman la muestra y la entregan por sí mismos, en ambos casos, se le da entrada a la muestra al laboratorio. El objetivo es obtener una muestra del tamaño adecuado para el análisis, con las mismas características cualitativas y cuantitativas que las del lote. Dicha toma de muestra debe estar acompañada con los siguientes documentos:Oficio de la empresa productora o del particular que solicita los respectivos análisis de los lotes muestreados.
Tarjeta de identificación de la muestra en la cual se debe llenar toda la información requerida a excepción del número de registro y el número de etiquetas (Figura 2).
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| Figura 2. Tarjeta de identificación
de la muestra |
· Identificación de la bolsa (la cual contiene la muestra) con el número del lote y del cultivar.
b) Recepción y registro de la muestra
Una vez que el técnico trae la(s) muestra(s) al laboratorio, con su respectiva relación de muestreo, tarjeta de identificación e identificación de la bolsa, se comprueba si los datos suministrados en la relación de muestreo coinciden con los datos contenidos en la tarjeta; luego se coloca el número de registro correspondiente, donde sus dos primeros dígitos indican el año en que fue procesada la muestra y los demás dígitos indican el número de muestras recibidas. Ejemplo: si una muestra es el número de registro 020208 quiere decir que fue procesada en el año 2002 y es la muestra número 208 que ingresa al laboratorio. Cuando se trata de semillas muestreadas por particulares y de semilla fría (reetiquetada) los usuarios del servicio deben cancelar el monto establecido previamente a la realización de los análisis. Los datos contenidos en la tarjeta de identificación tales como: número de registro, cultivo, cultivar, productor, técnico que realizó el muestreo, cantidad del lote, número del lote, tratamiento, se procesan de forma manual en el Libro de Registros y de igual forma en el sistema automatizado de etiquetado, donde se introducen estos datos en el formulario de Identificación de la Muestra para ir almacenando la información.Posteriormente se coloca el número de registro correspondiente en la planilla de análisis en la cual se colocan los resultados de los análisis (Figura 3).
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Figura 3. Planilla de Análisis de Calidad. |
c) Homogenización de la muestra
Este proceso se realiza a través de un aparato denominado homogenizador o divisor de muestras, el cual permite obtener una muestra más homogénea del lote muestreado. Entre los tipos de homogenizadores que se manejan en el laboratorio se encuentran el Gamet y el Boerner. El pase por el homogenizador se realiza tres veces para cada muestra.
d) Archivo de la muestra
Seguidamente, se envasa
parte de la muestra en un frasco debidamente identificado de 750 g de
capacidad. Esta muestra se archiva y se tiene almacenada en condiciones
apropiadas de temperatura y humedad relativa por espacio de un año, en
previsión de algún nuevo análisis que se requiera de la muestra.
e) Muestra de trabajo
La parte restante de la
muestra homogenizada es la que se va a utilizar como muestra de trabajo,
a la cual se le realiza los diferentes análisis. El peso de esta muestra
depende del cultivo con que se este trabajando, ya que según lo establecido
en las reglas de la ISTA (International Seed Testing Association),
para cada cultivo existe un peso establecido, que se va a utilizar para el
análisis de pureza.
2. Realización de los análisis
El técnico de semillas evalúa la calidad de una muestra de semillas representativa de un lote en particular, con la finalidad de verificar si cumple con los requisitos de calidad exigidos para su comercialización y luego proceder a la entrega de etiqueta según la categoría de semilla que pertenezca (en caso de semilla certificada). Los análisis a determinar son:
humedad, pureza, determinación de otras especies y mezcla de tipo.1. Análisis físicos:
1.2. Análisis fisiológicos: germinación viabilidad con tetrazolium y vigor.
1.3. Otros análisis: daños causados por insectos, daños mecánicos, semillas manchadas por microorganismos, semillas pregerminadas y presencia de insectos vivos y/o muertos.
De los análisis anteriormente descritos, los de humedad, pureza, mezcla de tipo (maíz) y germinación son los análisis que oficialmente se realizan en el laboratorio requeridos para la determinación de calidad y la impresión de las etiquetas de certificación; los demás análisis se realizan a solicitud de las empresas productoras o particulares que lo requieran.
Análisis Físicos
· Análisis de humedad: el objetivo de este tipo de análisis es determinar la cantidad de agua contenida por las semillas, utilizando métodos apropiados para ensayos de rutina. Los métodos prescritos tienen por objeto reducir la oxidación, descomposición o pérdida de otras sustancias volátiles, y al mismo tiempo asegurar el desprendimiento de toda el agua posible. Los métodos para la determinación del contenido de humedad son dos: el método de la estufa (método oficial) y el método de conductividad eléctrica (este método es más rápido y es el que se realiza en el laboratorio).
· Análisis mezcla de tipo: el objetivo de este tipo de análisis es determinar si la muestra y el lote de semilla de maíz presenta dimensiones homogéneas y si corresponde con el tipo establecido. Este análisis se hace por medio del método de los cedazos, tomando en cuenta los siguientes tipos: redondo, plano grande, plano mediano y plano pequeño.
· Análisis de pureza: este tipo de análisis presenta dos objetivos definidos que son: (a) determinar la composición en peso de la muestra que se analiza y, por consiguiente, la composición del lote de semillas y (b) la identidad de las distintas especies de semillas y de las partículas de materia inerte presentes en la muestra.
Análisis fisiológicos
· Análisis de germinación: el objetivo de este tipo de análisis es obtener información acerca del valor de las semillas, desde el punto de vista de su siembra en terreno de cultivo, y proporcionar resultados que permitan comparar el valor de los diferentes lotes de semillas. El porcentaje de germinación lo determina el porcentaje de plántulas normales.
· Análisis de viabilidad: el objetivo de este análisis es determinar el potencial de germinación de la semilla; como esta prueba es más rápida que el del análisis de germinación es muy solicitada para las semillas de pasto y el método que se utiliza es el de tetrazolium.
· Análisis de vigor: este análisis tiene como objetivo determinar el potencial de almacenamiento de las semillas y el método utilizado en el laboratorio es el de envejecimiento acelerado (temperatura de 40° C, 100% HR durante 72 horas). Este análisis generalmente es solicitado por las empresas importadoras de semillas de hortalizas.
Otros análisis
Estas determinaciones se realizan como complemento al análisis de pureza; por lo tanto son opcionales, a solicitud de los interesados. Las más usuales son: determinación de otras especies, daños mecánicos graves, daños por insectos, manchas por microorganismos y semillas pregerminadas.
3. Después de los análisis
Evaluación de los
resultados
Luego de haberse realizado
los análisis respectivos, se procede a evaluar los resultados,
tomando en cuenta los requisitos mínimos exigidos de calidad para la
semilla certificada según lo contemplado en las Normas específicas de
certificación para los diferentes cultivos (ajonjolí, arroz, caraota,
fríjol, girasol, maíz, maní, papa, sorgo y soya). Si cumple con los
mismos, se procede a aprobar el lote. Estos resultados son registrados
manualmente en el libro de registros e introducidos en el sistema
automatizado en el formulario respectivo de análisis
de laboratorio
1) Semilla certificada
a) Lote aprobado
Cuando se trata de semilla certificada, si el lote es aprobado, se procede a la impresión de las etiquetas.
· Impresión y entrega de etiquetas
En esta etapa se realiza la impresión de las etiquetas que pertenecen a los lotes aprobados de muestras de semillas, para ello se cuenta con un sistema automatizado del proceso de certificación de semillas del INIA, implementado a partir del año 1998, originado por la necesidad de obtener información oportuna y accesible a los diferentes usuarios de los laboratorios de semillas a nivel nacional. El sistema permite obtener información de todos los procesos que se realizan en la certificación de semillas (campo, laboratorio y empresas productoras). Así mismo, en el año 2001 se implementó y desarrolló el sistema de etiquetado como fase final de la sistematización de todo el proceso. Los formularios utilizados para manejar los procesos de la base de datos del sistema son los siguientes:
1) Modulo de procesos: En los formularios que a continuación se describen, se presentan las opciones de inclusión, modificación, impresión de informes generales, búsqueda de registros particulares por el n° de registro, consulta y eliminación de uno de los datos, lo que va a depender de la información que contenga cada formulario.
· Productor: en este formulario se almacena la información de las empresas productoras las cuales ya están registradas en la base de datos del sistema; si en algún caso ingresa una nueva empresa o productor se utiliza el mismo como se describe a continuación (Figura 3):
· Cultivo y cultivar: en este formulario se almacena la información referente a cultivo, cultivar, clase (Figura 5).
· Identificación de la muestra: es un formulario donde se ingresan los datos de la muestra y de la empresa productora que los suministra, necesarios para realizar los análisis de calidad.
Las muestras ingresadas pueden ser oficiales, sí el muestreo lo realiza el técnico del INIA y no oficiales, sí el muestreo lo realiza el productor, empresas importadoras o particulares. A continuación se detalla dicho formulario (Figura 6).
· Análisis de laboratorio: este formulario lleva el control de los resultados de los análisis de calidad realizados a la semilla. A la vez se presentan las opciones de inclusión, modificación, consulta o eliminación de un determinado registro (Figura 7).
· Etiqueta de certificación: en este formulario se incluyen aquellos cultivares que han cumplido con los requisitos mínimos exigidos de calidad dispuestos en la Resolución Reglamentaria N° 159 del Ministerio de Agricultura y Cría
– Dirección General Sectorial de Desarrollo Agrícola de fecha 23 de Abril de 1.986, con el objeto de comprobar su valor agronómico de utilización y/o otras características deseables para lograr su aprobación con fines de certificación. A la vez se presentan las opciones de inclusión, modificación, consulta o eliminación de un determinado registro (Figura 8).Si selecciona la opción Buscar podrá hacerlo por número de registro o de lote, para ello debe insertar el n° de registro de inscripción de la muestra o el número del lote. Una vez realizada esta operación, se presiona enter y automáticamente se carga en el formulario el nombre del cultivo, cultivar, clase, zona u origen, n° de sacos, fecha de análisis, fecha de vencimiento y se activa el campo de Etiqueta desde para incluir el número de la etiqueta a imprimir. Después se debe dar clic en Guardar para que automáticamente se sume el número de Etiqueta hasta.
Posteriormente se hace clic en el botón reportes y se tiene la opción de imprimir las etiquetas de certificación, apareciendo la vista preliminar de la información que se va a imprimir en la etiqueta de certificación y haciendo clic en la imagen de la impresora, comienza a imprimirse las etiquetas (previa preparación de las etiquetas en la impresora que se está utilizando) (Figura 9).
Las etiquetas utilizadas para la impresión vienen previamente impresas de la empresa gráfica en forma continua, con la información que complementa a la que genera la base de datos y diferencia la clase de semilla que tiene cada cultivar, con el color de la etiqueta, en donde:
color blanco, es para la clase Genética o Fundación
color rojo púrpura, para la clase Registrada
color azul claro, para la clase Certificada y
color verde claro, para la clase Fiscalizada.
A continuación se muestra un modelo de la etiqueta de certificación impresa por el sistema (Figura 10):
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· Cobro de los derechos de certificación o análisis
Para el cobro de los derechos de certificación y análisis (cuando se trata de semilla reetiquetada) se debe hacer clic en el botón específico Relación de Certificación y aparece la planilla específica para los lotes que se les otorga las etiquetas de certificación del cultivo, cultivar y empresa productora, así como el monto que deben cancelar, ya sea por derechos de certificación o análisis (ver anexo hoja posterior).
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La cancelación de los análisis, como se dijo anteriormente, se realiza en el momento de entregar la muestra para la realización de los respectivos análisis.
Capítulo 3
Glosario
Análisis de calidad: conjunto de procedimientos por medio de los cuales se determinan las características de una muestra de semillas, de acuerdo con los requisitos establecidos en la norma respectiva.
Calidad de semilla: término que involucra cuatro componentes: genética (genotipo), físico (aspecto general), fisiológico (germinación y/o vigor) y sanitario (carencia de enfermedades transmisibles por semilla).
Certificación de semillas: proceso técnico de supervisión y verificación realizado por el Senasem, destinado a mantener la identidad genética, pureza, calidad y sanidad de las semillas, de acuerdo con los requisitos establecidos por la norma.
Cultivar: conjunto de plantas que son distinguibles por determinadas características (morfológicas, fisiológicas, citológicas, químicas u otras) significativas para propósito agrícola, las cuales cuando son reproducidas (sexual o asexualmente) o reconstituidas, retienen sus características distintivas.
Entidad certificadora: ente designado oficialmente por el gobierno para realizar la función de certificación de semillas.
Etiqueta o marbete: tarjeta impresa que debe adherirse al empaque o envase de la semilla, en la cual se consignan los estándares de calidad que debe reunir la semilla para su venta.
Lote de semilla: una cantidad específica de semilla empacada, de calidad relativamente uniforme identificable físicamente, respecto a la cual se puede emitir un Certificado Internacional de Análisis.
Muestra: porción de semillas representativas de un lote.
Muestra de trabajo: la porción de la muestra que se toma para hacer las determinaciones correspondientes.
Productor de semillas: toda persona natural o jurídica debidamente registrada y autorizada por el Senasem, que se dedique directamente y bajo su responsabilidad a la multiplicación, acondicionamiento y manejo de semilla, debiendo contar con su servicio técnico especializado.
Semilla: toda estructura botánica destinada a la propagación sexual o asexual de una especie.
Semilla genética o del fitomejorador: es la semilla de la primera generación resultante del proceso de mejoramiento genético capaz de reproducir la identidad de un cultivar, manejada y conducida por un fitomejorador a partir de la cual se producen semillas básicas o de fundación.
Semilla de fundación: es la semilla obtenida de la semilla genética, producida bajo la supervisión de un fitomejorador o entidad creadora del cultivar, sometida al proceso de certificación y que cumpla con los requisitos establecidos.
Semilla registrada: es aquella obtenida a partir de la semilla básica o de fundación sometida al proceso de identificación y que cumple con los requisitos establecidos para esta categoría de semilla.
Semilla certificada: es aquella proveniente de semilla de fundación, o semilla registrada, sometida al proceso de certificación y que cumple con los requisitos establecidos para esta categoría de semilla.
Semilla fiscalizada: la proveniente de cultivares genéticamente mejorados, cuyo producto final es debidamente aprobado y que cumple con todos los requisitos establecidos en el reglamento de la categoría de semilla certificada, excepto con el registro de la genealogía.
Referencia de este artículo:
Márquez, Maritza 2003. Manual de laboratorio para el análisis y la certificación de semillas. En: CENIAP HOY no. 2, mayo-agosto 2003. ISSN: 1690-4117. Maracay, Aragua, Venezuela. URL: www.ceniap.gov.ve/ceniaphoy/articulos/n1/texto/mmarquez.htm visitado en fecha:
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